精子顯微鏡注射過程是怎樣的

  這篇文章我們詳細(xì)來介紹下精子顯微鏡注射過程是怎樣的，希望通過本文的介紹，大家有一個詳細(xì)的了解。

  第1步.顯微注射系統(tǒng)更主要的儀器包括倒置顯微鏡和置于它兩側(cè)的顯微操作儀。倒置顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)應(yīng)具有三維立體視覺，對精子形態(tài)觀察可以細(xì)致入微，辨別優(yōu)劣。載物臺配置37℃恒溫墊板，以確保注射時卵子的溫度恒定。操作儀的持卵側(cè)容易控制，持卵針可自己拉制。持卵針的前端要平滑，內(nèi)徑要小，以免吸進(jìn)卵細(xì)胞質(zhì)。持卵針外徑要比卵的直徑略小為宜。

  第2步.精子制動與注射持卵針和注射針分別安裝到固定器上，持卵針和注射針要調(diào)至一個平面水平，左右呈一條直線。注射針的前端要與皿底平行。

  第3步.將準(zhǔn)備好的上游精子用拉制好的細(xì)玻璃管吸幾個微升至培養(yǎng)皿中的PvP滴中，在20倍物鏡下尋找形態(tài)正常、游動的精子，用注射針的前端貼培養(yǎng)皿底壓住精子尾部中段，注射針對尾部施壓摩擦至擦破尾部的質(zhì)膜，然后先尾部后頭部將精子緩慢吸入注射針前端。精子制動目的不僅使注射針易于控制精子的吸人，另一目的是從尾部擦破點釋放出的精子細(xì)胞質(zhì)和卵子的激活有關(guān)。

  第4步.無誤地將質(zhì)量好的精子吸入注射針前端，并能控制精子在前端移動速度至關(guān)重要，控制精子的移動要達(dá)到從PVP滴移到培養(yǎng)液小滴的過程中不丟失精子。卵子在培養(yǎng)箱外的時間不宜超過30分鐘，較好每組卵注射時間在15分鐘內(nèi)完成，并及時將已注射的卵放回培養(yǎng)箱中。卵子放人注射皿的時間和方式根據(jù)操作者自己來定，只是要注意對卵子的保護(hù)問題。

  第5步.在低倍鏡下將吸有精子的注射針以移動注射皿的方式進(jìn)入放有卵子的培養(yǎng)滴，持卵針降下到皿底的培養(yǎng)液滴吸住卵子，將第二極體定位在7點的位置。好的持卵針能穩(wěn)固地吸牢卵子，卵子可接觸皿底，也可懸空，兩種位置都不影響注射。

  第6步.精子注射5至6小時后，可形成雌性和雄性原核。在臨床的IVF中心，一般注射后第二天清晨檢查受精情況。平均ICSI受精妊娠率應(yīng)在80%以上，其中一個雌性原核一個雄性原核的2PN受精卵占總受精的90%左右;兩個雌性原核(第二極體、未排卵)一個雄性原核的3PN受精卵時有發(fā)生，約占5%一10%。

  以上就是專家的詳細(xì)介紹，相信大家在此基礎(chǔ)之上都有一定的了解，希望對大家有所幫助。